Browne, RK., J. Seratt, CK. Vance, and A. Kouba. 2004 Hormonal induction of spawning and spermiation in the Wyoming toad (Bufo baxteri) with in vitro fertilization. In prep.

 

我们为了拯救濒临灭绝的怀俄明蟾蜍开展了一个重要的项目，希望借此提高它们圈养的繁殖率和适应性。成年蟾蜍喜欢群居，在左图所示的经改装后的每个水族箱里，最多可以容纳五个蟾蜍。水族箱底的海绵垫子最好两天洗一次，蟾蜍喜欢在树桩上晒日光浴。它们好食各种各样的蟋蟀，我们偶尔也会喂给它们一些粉虫和蜡虫，这些对它们来说更是美味佳肴。
左图所示，这是一只雌性大蟾蜍，它正在树皮上晒太阳，另外两只比她个头小的雄性蟾蜍都对它爱慕有加，不过母蟾蜍似乎表现出一些不适，它的喉部下方有些水肿。而最近有研究表明这种现象在蟾蜍身上是普遍存在的。

 

  左图所示是第一批为了放归而饲养的蟾蜍，采用的受精方法是试管受精。试管受精不需要蟾蜍交配，只需要把精液和卵子取出就可以了。我们对蟾蜍使用了激素，在箱子的后部，右手抓住蟾蜍的下部，使劲捏它以鼓励它产卵，然后把不同雄性蟾蜍的精液混合到一起，再用不同的雌性蟾蜍的卵子和这些精液混合来产生很多的基因多样性。这就要求我们检验很多的卵子样品，选取其中高质量的来保证这些受精卵可以成功孵化成小蝌蚪。
左图所示是我们正在用显微镜检测卵子，我们在它们受精后6－8小时，正处于8－32个细胞的时期检测其受精率。通常只有大概15％的卵子能够成功受精并孵化成蟾蜍，我们现在正致力于研究如何让更多的卵子受精孵化。受精卵一般需要三天就会孵化。

 

左图所示，经过检测的受精卵，不好的肯定被抛弃了，余下的要一直等到它们孵化。在这期间，要经常观察，以防它们被细菌感染。如果在水里有牛奶一样的细菌圈出现的话，就一定要把受精卵换到另一个培养皿里，保持观察，直到它们孵化出来。

 

一旦小蝌蚪孵化出来，就要把它们和那些不能孵化的卵分离，可以把小蝌蚪放在水深约1.5cm的培养皿中。每天都要给它们换水，并可以喂给它们少量的螺旋藻。每天要做常规检察，把不生长的和死的小蝌蚪清除掉。

 

左图所示，因为人工影响了蟾蜍的产卵，一些卵子看起来比正常的要小，因此我们必须花更多的精力照顾好这些脆弱的小蝌蚪。在左图所示的小盘里，有许多偏小或是畸形的小蝌蚪，它们当中有一部分在开始游动之前就已经死去了。

 

左图：换水的时候，先把蟾蜍的幼虫放在一个细密的网里，要注意的是从培养皿里往网里倒蟾蜍的时候，要非常小心，速度要尽量慢。另外最好在网下面再放一个盛水的容器，如果蟾蜍幼虫比较小的话，这种卤虫网就非常适合，但相比较那些网眼较大的网，它也会接住更多的沉淀物。  
左图所示，培养皿底部覆盖有很多螺旋藻，它们是蟾蜍幼虫的食物，小蟾蜍是如何移动的对我们来说仍旧是个迷。我们至今仍不知道它们是如何在其表面滑行运动的。

 

左图所示，我们在养蟾蜍幼虫的小盆里放入了一些碎肉和水草，同时还喂给它们一些螺旋藻（一种健康的食物）。不同的时期，蟾蜍幼虫会喜欢不同类型的食物。

 

下图所示，大多数的蟾蜍蝌蚪被运到怀俄明Lindzey湖放生，孟菲斯动物园保留了一些蝌蚪是为了增加种群的数量。当蝌蚪长出前肢时，我们会把它们放进一个试管里，里面会放一些水，并将试管倾斜，这样当蝌蚪变成小蟾蜍时，它们就可以自己游出水面。一般来说大约三个星期后，蝌蚪就可以变成小蟾蜍了。


下图所示，是我们正在给刚长成的小蟾蜍喂果蝇、钙以及一些维生素。

左图所示：果蝇被放在一个带眼的容器里，它们可以从中飞出来，这样做的目的是在保证所有的小蟾蜍都可以吃到果蝇的同时，又不让小盆里有太多果蝇。

 
左图所示，当小蟾蜍长大一些后，我们会先把它们放在湿的纸巾上，并会每天更换。之所以这样做是因为小蟾蜍的数量和食物之间要保持平衡。比较好的解决办法是数量和食物都保持较高密度，当然前提是每天都要做好清洁工作。
小蟾蜍们在几周之内很快就长到超过半英尺了，它们正茁壮成长。
图片为MORTENSON湖：由MICHELLE GERAUD提供

自从1998年我们在怀俄明州Mortenson湖畔捕获到最后一批存活的怀俄明蟾蜍并把它们投入到人工繁殖的项目中去后，每年我们都会在那里放生一批怀俄明蟾蜍蝌蚪。2004年我们欣喜地发现，在Mortenson湖畔有数目可观的俄明蟾蜍产下了后代。2004只蝌蚪中有1990只在Lindzey湖畔被放生，它们将和其它8000多只蝌蚪一起生活在它们的新家。
米歇尔(Michelle Geraud)展望说：如果它们能存活下来，并且在2005年春天产下后代的话，这将是多么有趣的一件事。只要想想有一天当你回到MORTENSON 湖畔，在其西北岸边的某处田野，你竟然发现了4枚怀俄明蟾蜍卵聚在一起，其中两枚似乎是刚刚才被产下的，另外一枚正在发育中，而第四枚已经到了快孵化的阶段，这将是多么令人振奋的情景。